Este estudo teve como objetivo determinar a presença de anticorpos anti-Neospora caninum em vacas lactantes pertencentes às propriedades rurais do município de Araguaína, Tocantins, Brasil. Para isso, amostras de sangue de 192 vacas foram selecionadas aleatoriamente e analisadas pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos da classe IgG anti-Neospora caninum. Foram utilizados como antígeno taquizoítos do isolado Nc-1 do parasito, cultivados em células Vero, sendo o ponto de corte correspondente aos títulos superiores a 1: 200. Realizou-se ainda a titulação das amostras positivas até a diluição 1: 6.400. Das amostras analisadas, 48 (25%) mostraram-se positivas e, nas propriedades analisadas, a prevalência foi de 12, 5% a 33, 33%, o que revelou exposição dos animais ao parasito no município de Araguaína, sendo este o primeiro registro no estado do Tocantins.